Stable cell lines establishment
穩定細胞株構建
慢病毒載體（Lentiviral vector, LVs）是在HIV-1病毒基礎上改造而成的病毒載體系統，它能高效將目的基因（或RNAi）導入動物和人的原代細胞或細胞系。慢病毒載體基因組是正鏈RNA，其基因組進入細胞后，在細胞漿中被其自身攜帶的反轉錄酶反轉為DNA，形成DNA整合前復合體，進入細胞核后，DNA整合到細胞基因組中。整合后的DNA轉錄mRNA，回到細胞漿中，表達目的蛋白；或產生RNAi干擾。
慢病毒載體介導的基因表達或RNAi干擾作用持續且穩定，原因是目的基因整合到宿主細胞基因組中，并隨細胞基因組的分裂而分裂。另外，慢病毒載體能有效感染并整合到非分裂細胞中。以上特性使慢病毒載體與其它病毒載體相比，比如不整合的腺病毒載體、整合率低的腺相關病毒載體、只整合分裂細胞的傳統逆轉錄病毒載體，有鮮明的特色。大量文獻研究表明，慢病毒載體介導的目的基因長期表達的組織或細胞包括腦、肝臟、肌肉、視網膜、造血干細胞、骨髓間充質干細胞、巨噬細胞等，又很少引發機體免疫反應，能達到良好的基因治療效果，具有廣闊的應用前景。已成為國際上最通用的轉染系統之一，廣泛用于各類實驗室。
我司采用的慢病毒載體屬于“第三代”慢病毒載體，其基因組的3’LTR的增強子功能發生了缺失，從而形成了所謂的“自滅活”（Self-inactivation，SIN），即該病毒基因組整合到細胞基因組后，不會產生新的子代病毒，也降低了對周圍基因的意外激活，因此具有較好的安全性。
我司慢病毒載體系統由表達載體pLenti-gene、包裝輔助載體pGag/Pol和pRev、包膜載體pVSV-G四質粒組成。可以根據實驗目的采用不同的表達載體pLenti-gene，如基因表達研究采用pLV-Gene、RNA 干擾采用pLV-U6等進行研究。pGag/Pol載體中含有HIV 病毒的gag 基因，編碼病毒主要的結構蛋白；pol 基因，編碼病毒特異性的酶；pRev 載體編碼rev 基因，是調節gag 和pol 基因表達的調節因子。pVSV-G載體中含有單純皰疹病毒來源的VSV-G 基因，提供病毒包裝所需要的包膜蛋白。
銷售咨詢
技術支持
